組織培養是什么?操作步驟是什么？

植物組織培養是什么？

植物組織培養是在無菌的情況下，將植物體內的某一部分器官或組織，如莖尖、芽尖、形成層、根尖、胚芽和莖的髓組織等從植物體上分離下來，放在適宜培養基上培養，經過一段時間的生長、分化最后長成一個完整的植株。

植物組織培養廣義又叫離體培養，指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞，原生質體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養物質及植物激素的培養基上進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。

植物組織培養狹義是指用植物各部分組織，如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進行培養獲得再生植株，也指在培養過程中從各器官上產生愈傷組織的培養，愈傷組織再經過再分化形成再生植物。

植物組織培養操作步驟是什么？

1、將采來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細洗干凈，如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數小時，沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料，可裝入紗布袋內沖洗。流水沖洗在污染嚴重時特別有用。洗時可加入洗衣粉清洗，然后再用自來水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物，除去脂質性的物質，便于滅菌液的直接接觸。當然，最理想的清洗物質是表面活性物質-吐溫。

2、對材料的表面浸潤滅菌。要在超凈臺或接種箱內完成，準備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手表等。用70%酒精浸10~30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強，也很易殺傷植物細胞，所以浸潤時間不能過長。有一些特殊的材料，如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內部的材料，則可只用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件下，待酒精蒸發后再剝除外層，取用內部材料。

3、用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據情況選取1~2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視采用的消毒液種類，涮洗3~10次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細胞的副作用注意:

①酒精滲透性強，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時間要短，防止酒精殺死植物細胞。

②老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。

③升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。

④漂白粉容易導致植物材料失綠，所以對于幼嫩材料要慎用。

⑤在消毒液中加入濃度為0.08~0.12%的吐溫20或80(一種濕潤劑)，可以降低植物材料表面的張力，達到更好的消毒效果。